スピンカラムで迅速・簡単にN-グリカンを除去

Immobilized PNGase Fは、酵素であるPNGase Fがスピンカラム形式でアガロースビーズに共有結合しており、抗体、融合タンパク質、その他のN-グリコシル化タンパク質上のN-グリカンを簡単に除去できる製品です。

Immobilized PNGase Fの詳細

Immobilized PNGase Fは、酵素であるPNGase F(Peptide N-glycosidase F)がスピンカラム形式でアガロースビーズに共有結合しており、抗体、融合タンパク質、その他のN-グリコシル化タンパク質上のN-グリカンを簡単に除去できる製品です。本酵素は、遺伝子組み換え法によりElizabethkingia meningoseptica由来の遺伝子を大腸菌で発現させて製造されています。
糖タンパクのサンプルは、スピンカラム内でImmobilized PNGase Fとともに通常反応条件で1時間から一晩、または変性反応条件（RapiGest™ SF Surfactantを利用）で15〜60分間インキュベートします。次に、脱グリコシル化された糖タンパクは、遠心分離によって容易に収集可能です。 一部の糖タンパクに対するPNGaseFの活性は、立体障害のために低下するか、阻害される可能性があります。これらの場合、より長いインキュベーション時間または糖タンパクの変性が必要になる場合があります。

Immobilized PNGase Fの酵素の特徴

PNGase Fは、「ポリペプチドのアスパラギン」と「オリゴサッカライドの最も内側のGlcNAc」との間のアミド結合を加水分解するグリコアミダーゼです。 これは、すべての哺乳類のアスパラギンに結合する複合型・ハイブリッド型・高マンノース型のオリゴサッカライドに対して作用します。反応を通して、グリカンが除去されたアスパラギン残基はアスパラギン酸に脱アミノ化されます。放出されたオリゴ糖はそのまま残され、さらなる分析に使用が可能です。N-グリカンの除去は、MS分析におけるサンプル前処理（タンパク質の不均一性を低減し、放出された糖鎖分析を可能にする）、およびN-グリカンの機能的役割の研究に広く利用されています。

主な製品ラインナップ

Immobilized PNGase F

マイクロスピンカラムには、0.2mgの糖タンパクからNグリカンを除去するのに十分な量の酵素が含まれています。これは20%エタノールに満たされた状態で供給され、5また10カラム単位で注文可能です

Immobilized PNGase F Denaturing

上記Immobilized PNGase Fに加え、RapiGest™* SF Surfactantがバイアルで提供されます。Immobilized PNGase Fのカラム1本に対して、1 mg RapiGest™ SFのバイアル1本が同梱されています。RapiGest™SFは室温で保存する必要があります。 高純水またはバッファー（pH 7〜10）で溶解し、+ 2〜8°Cで保存した場合、溶液は1週間安定です。

• 製品の詳細はこちらです-> https://www.genovis.com/products/immobilized-pngasef/
• プロダクトシート-> https://www.genovis.com/wp-content/uploads/instructions-pngasef-immobilized.pdf


特殊性・専門性が高い製品ですので、使用方法や製品に関する質問がございましたらお気軽にご連絡ください。
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